Phương pháp plaque assay:- Sử dụng

Phương pháp plaque assay:
- Sử dụng phương pháp agar 2 lớp (André Gratia, Mark Adams) để xuất hiện các mảng bám được gọi vòng vô khuẩn hoặc đốm tan (plaque) dễ dàng và chính xác hơn trong việc phân lập các dòng thực khuẩn thể, các vòng này xuất hiện là do thực khuẩn thể xâm nhiễm và giết chết vi khuẩn ký chủ của nó.
- Đổ 1 lớp môi trường agar đặc nồng độ 1,7% lên đĩa cấy, môi trường agar đặc có tác dụng củng cố và giữ vững bề mặt agar mềm ở phía trên. Sau đó, ta đổ lên bề mặt agar đặc 1 lớp mỏng agar mềm đã bơm vi khuẩn ký chủ vào bên trong, tráng đều ra đĩa cấy.
- Sử dụng micropippet và cone loại đầu nhỏ, rút lấy một ít dịch thô thực khuẩn thể, nhỏ từng giọt thành hình tròn lên bề mặt agar, sau đó đem ủ 24 giờ ở nhiệt độ phòng.
- Sau 24 giờ, ta sẽ quan sát được các đốm tan xuất hiện trên bề mặt vi khuẩn ký chủ. Quan sát hình dạng, đặc điểm của đốm tan để tiến hành phân lập các dòng thực khuẩn thể. Thu lấy các đốm tan có hình dạng và đặc điểm khác nhau đem trữ vào môi trường đệm SM (5,8g NaCl, 2g MgSO4.7H2O, 50 ml Tris HCl (pH7.4) 1M và 5 ml 2% gelatin 2% cho mỗi lít), trữ vào trong tủ lạnh 40C để sử dụng trong tương lai.

Kết quả (Anh) 1:

Plaque assay method:-Using agar 2 layers (André Gratia, Mark Adams) to appear the endless round of bacteria called plaque or pale tan (plaque) easily and more precisely out of the isolated phage, the lines of this round appears to be due to bacterial infection and invasive can actually kill bacteria sign of it.-Pour 1 environmental class a special agar concentration of 1.7% on dental implants, the environment has the effect of strengthening special agar and hold soft agar surface at the top. Then, I poured onto the surface of the agar, special-1 thin layer soft agar has signed on to host bacteria pump inside, coated are both off the disk implanted.-Use micropippet and cone type small head, taking a little rough translation can small drops, phage into the circle onto the surface of the agar, then incubated for 24 hours at room temperature. -After 24 hours, we will observe the tan markings appear on the surface of bacteria sign. Observe the shape, characteristics of the tan spots to conduct isolated phage lines. Currency taking shape and tan spots different characteristics to provide buffer environment SM (5, 8 g NaCl, 2 g MgSO 4.7 H2O, 50 ml Tris HCl (pH 7.4) and 5 ml of 2% 2% gelatin per quart), stored in the refrigerator 40 c to use in the future.

Kết quả (Anh) 2:

Plaque assay methods:
- Use of 2-layer agar method (Andre Gratia, Mark Adams) to appear within the plaque is called aseptic or mottled tan (plaque) easily and accurately than in isolating the real line bacteriophages, the rings appear as infection by bacteriophages kills bacteria and its hosts.
- Fill 1 layer agar concentration of 1.7% to specialty plate, agar special effects strengthen and maintain the surface above the soft agar. Then we poured over the surface of agar agar thin layer of software features 1 bacteria were injected into the host, are coated with a dish.
- Using the small end micropippet and cone type, draw took a little rough translation bacteriophages , dripping in a circle on the surface of agar, then incubated for 24 hours at room temperature.
- after 24 hours, we will observe tan spots appear on the surface of host bacteria. Observe the shape and characteristics of mottled tan to conduct isolated bacteriophages lines. Obtain shaped tan spots and different characteristics provide buffer storage environment into SM (5,8g NaCl, 2g MgSO4.7H2O, 50 ml Tris HCl (pH7.4) and 5 ml 1M 2% 2% gelatin for per liter), 40C stored in the refrigerator for future use.